Penisillinaasi on stafylokokkien tuottama beetalaktamaasientsyymi, joka rikkoo penisilliinin sisältämän beetalaktaamirenkaan. Tästä syystä kapeakirjoiset penisilliinit eivät tehoa stafylokokkeihin. Penisillinaasin EC-numero eli entsyyminumero on EC 3.5.2.6.
Penisillinaasia kestäviä penisilliinejä ovat metisilliini, oksasilliini, kloksasilliini ja diklosasilliini.